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说明书
C2501WB Super RIPA Lysis Buffer100ml200
C1901Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer100ml200
         对目的蛋白进行检测分析时,总蛋白的提取至关重要,如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败,如:信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液,才能最大程度地保证后续实验的成功。
Co-IP/IP RIPA裂解液对细胞有一定的裂解能力,能获得较多的胞浆蛋白,而对细胞核的裂解能力有限,不能完全裂解细胞核,因此获得的总蛋白适用于IP或CO-IP实验;而WB Super RIPA Lysis Buffer对动物组织和细胞的裂解能力极强,它可以完全裂解细胞核和线粒体,并可提取到更多的膜蛋白,从而可获得更多的总蛋白。因其超强的裂解能力,使得大量的基因组DNA从细胞核中释放出来,使蛋白变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。经海基RIPA裂解液获得得蛋白可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度;使用Bradford法测定由本裂解液裂解所得到样品的蛋白浓度会稍有误差。
RIPA裂解液
WB RIPA&IP RIPA裂解液对比
    WB RIPA裂解液 IP RIPA裂解液
裂解程度
胞浆蛋白释放 +++++ ++++
膜蛋白/核蛋白释放 ++++ ++
核蛋白丢失 几乎没有 +++
膜蛋白丢失 几乎没有 +++
蛋白活性 丢失 保留
储存
置于室温阴凉处,可保存2年。
功能测试
(该实验结果来自HaiGene实验室,未经允许,不得转载)
RIPA裂解液
Fig.用WB Super RIPA Lysis Buffer和Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer分别提取核蛋白PPARγ和膜蛋白PLD-1,上样量分别为40ug和10ug总蛋白,ECL发光液显色。A/C泳道为WB Super RIPA Lysis Buffer,B/D泳道为Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer。由此图比较分析表明WB Super RIPA Lysis Buffer能更充分的释放核蛋白和膜蛋白,从而获得更强的信号。