货号
| 名称
| 规格
| 价格(元)
| 说明书
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| D0602 | Hi T7 高产RNA 合成试剂盒 | 25T | 800 |  |
| A3601 | Hi T7 RNA Polymerase | 5KU | 450 | |
| 25KU | 1750 |
| A0304 | rNTP Mixture(25 mM each) | 0.5 ml | 500 | |
| S2003 | 2xRNA Loading Buffer | 2 ml | 100 | |
| S2004 | 7.5M LiCl溶液（for RNA Precipitation） | 20 ml | 150 | |
| S2005 | 5XTBE RNA电泳缓冲液（for RNA） | 400 ml | 200 | |
Hi T7高产RNA合成试剂盒是基于Hi T7 RNA聚合酶而组建的试剂盒，20 μl反应即可获得100-120 μg的总产量。利用该T7高产RNA合成试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA，如mRNA、lncRNA、shRNA等。Hi T7 RNA聚合酶识别T7 promoter（TAATACGACTCA CTATA G G）以倒数第二个G碱基为起点开始转录，转录长度可达6000nt以上。利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用，如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。
Hi T7 RNA Polymerase对T7噬菌体启动子具有高度的特异性，并可以其作为启动子，DNA作为模板体外合成正义链。双链线性质粒DNA、PCR产物均可作为该酶的底物模板。Hi T7 RNA聚合酶经电子重构架及库筛选，与Wild型比较来看，在以下性能方面有明显提升:（1）酶的DNA模板结合区域亲和力更高，使其具有持续合成能力，从而获得更高的产量，并易于长片段RNA的合成。（2）酶的耐热性能大幅提升，在37~45℃下均可有效的工作，高温的转录反应减少了dsRNA二级结构，便于药用核酸的制备。该酶为重组纯化制品，无DNase和RNase污染。
应用
- 制备放射标记的 RNA 探针
- 合成用于体外翻译的 RNA
- 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
- 合成 RNA 反义链，调控基因表达
酶储存液
10 mM Tris-HCl, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.01% (w/v) Triton X-100 , pH 7.5。
功能测试
（该实验结果来自HaiGene实验室，未经允许，不得转载）
1.不同酶量的体外转录测试：分别用1.25U/μl(泳道1)、2.5U/μl(泳道2)、5U/μl(泳道3)和10U/μl(泳道4)的Hi T7 RNA 聚合酶，37°C反应1h，取0.1ul进行琼脂糖凝胶电泳。
2.不同反应时间的体外转录测试：向反应体系中加入5U/μl的 Hi T7 RNA 聚合酶, 37°C反应分别反应1h、2h和3h，取0.1ul进行琼脂糖凝胶电泳。
3.不同长度模板的体外转录测试：向反应体系中加入5U/μl的 Hi T7 RNA 聚合酶, 分别转录1000nt、3000nt和6000nt的产物，37°C反应1h，取0.1ul进行琼脂糖凝胶电泳。
4.DnaseI对转录产物的作用：将实例3获得的转录产物等比例混合后, 分别用25mU/μl(泳道1)、50mU/μl(泳道2)、0.1U/μl(泳道3)和对照不加(泳道4)Rnase Free DnaseI（D3001）37°C消化10min后，进行琼脂糖凝胶电泳，结果表明Dnase I可将反应体系中残留的DNA模板消化，但对转录RNA产物几乎无影响。
