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货号
| 名称
| 规格
| 价格(元)
| 说明书
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C5013 | 牛痘病毒-拓扑异构酶(Topoisomerase I ) | 500pmol | 1,500 |  |
Vaccinia Virus Topoisomerase I 来源于牛痘病毒,通过基因重组方案制备纯化。HaiGene
TOPO酶能解旋DNA的超螺旋结构,此外还能识别并切割双链DNA末端 [5’C(T)CCTT],并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。因此,该
TOPO酶可作为DNA连接的有效工具酶,用于DNA的载体连接(TOPO克隆载体制备)、接头连接(NGS建库)等实验。
组分
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组分名称 |
数量 |
Vaccinia TOPO (5pmol/μl) |
100 μl |
10×TOPO Buffer |
1 ml |
2M NaCl |
1 ml |
应用
- DNA-载体连接(TOPO载体制备)
- 接头连接(NGS建库)
功能测试
(该实验结果来自HaiGene实验室,未经允许,不得转载)
1.牛痘病毒TOPO酶I催化含有CCCTT末端片段的连接和共价交联反应。在10μl反应体系中,4pmol的A接头盒含5'OH的B接头连接,
两接头间含有8bp的互补碱基,37℃反应10min后于12%TBE-PAGE-尿素胶电泳,结果显示TOPO有效的共价交联A接头,并催化两片段连接。
2.牛痘病毒TOPO酶I催化超螺旋质粒缺刻反应。在10μl反应体系中,加入0.5μg的超螺旋质粒DNA和不同量的TOPO酶,37℃孵育5min,结果显示TOPO酶可使超螺旋DNA快速开环。